首页、信无双娱乐主管首页精选公文范文管理资料[键入文字][键入文字][键入文字]癍痧凉茶的成分分析和指纹图谱评价广东凉茶是岭南人民根据本地气候、水土特性，研制总结出的一类具有清热解毒、生津止渴等功效的植物饮料。癍痧凉茶是一种着名的广东凉茶，具有清热解毒、祛湿除癍、消暑散热、化痰止咳、开胃消滞等独特疗效，现市场上销售的癍痧凉茶有“平安堂”两种品牌。由于癍痧凉茶是采用多味中药熬制而成的复方制剂，成分复杂，涵盖了不同极性、多个种类的化合物，分析和鉴定其中的化学成分成为该产品质量控制以及阐明其作用机理的关键。指纹图谱是评价中药和中药制剂整体质量的有效手段。中国和美国国家食品药品监督局、德国药用植物学会、英国草药典、印度草药典和加拿大药用及芳香植物学会等机构均将指纹图谱作为质量控制标准的内容之一。高效液相色谱HPLC紫外检测精选公文范文管理资料[键入文字][键入文字][键入文字]UV二极管阵列检测DAD是目前最为成熟的指纹图谱分析方法。然而，中药含有很多无共轭体系的化合物，因其没有紫外吸UVDAD指纹图谱上无法表现出来，从而造成指纹图谱信息的不完全。这一不足可以通过高效液相色谱质谱联用HPLCMS得以克服。HPLCMS因具有比HPLCUVDAD更好的化合物分析和鉴定能力而应用于中药分析研究，在中药指纹图谱分析方面更具优势。本文以“黄振龙”和“平安堂”癍痧凉茶为研究对象，采用高效液相色谱飞行时间质谱法HPLCTOF－MS和高效液相色谱MS对其所含化学成分进行分析，同时采用HPLCMS建立了癍痧凉茶的液质联用指纹图谱，并采用主成分分析对41批次的癍痧凉茶的质量稳定性和一致性进行了评价。精选公文范文管理资料[键入文字][键入文字][键入文字]1200高效液相色谱仪配备二元梯度泵、在线脱气机、自动进样器、柱温箱，TOFMS飞行时间质谱仪，TrapXCT离子阱质谱仪，Poroshell120SBC18快速分离型高效液相色谱柱150mm购于美国Agilent公司。甲醇、乙腈色谱纯，美国Sigma公司实验用水为超纯水设备美国Millipore公司制备的超纯水。对照品:葡萄糖酸、奎宁酸、苹果酸、柠檬酸均购自美国SigmaAldrich公司;没食子酸购自中国药品生物制品检定所;异绿原酸B、异绿原酸C、木犀草苷、黄芩苷购自四川成都普思生物科技有限公司。所有对照品的纯度均大于98%。21HZL癍痧凉茶样品和20PAT癍痧凉茶样品分别购自广州黄振龙凉茶连锁店和平安堂凉茶连锁店。精选公文范文管理资料[键入文字][键入文字][键入文字]mg置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，作为单一对照品溶液。分别精密吸取各单一对照品溶液mL至50mL容量瓶中，甲醇稀释定容，得到4mgL混合对照品溶液。“黄振龙”和“平安堂”癍痧凉茶样品微孔滤膜后，分别采用1200HPLCMSTrapXCTMS进行分析。色谱柱:AgilentPoroshell120SBC18150mm5%甲酸，40min，040～60min，45%～95%后运行10min，0%B。流速离子阱质谱分析:电喷雾ESI离子精选公文范文管理资料[键入文字][键入文字][键入文字]源，正、负离子扫描模式;雾化气N2345kPa，干燥气N2流速10Lmin，干燥气温度350毛细管电压4000500。AutoMS3个离子进行二级和三级质谱分析。飞行时间质谱分析:ESI离子源，负离子模式检测;雾化气N2压力345kPa，干N2流速10min，干燥气温度350000V，碎裂电压100V，锥孔电压65500，Profile模式记录，高分辨测试参比离子1129856、1033988色谱条件的优化考察了不同比例的甲醇5%甲酸水溶液和乙腈－05%甲酸水溶液为流动相时各化合物的分离效果，结果发精选公文范文管理资料[键入文字][键入文字][键入文字]现有机相为乙腈时的洗脱效果优于甲醇，各色谱峰分离效果更为理想。而5%甲酸的加入可以有效改善有机酸成分色谱峰的拖尾现象，因此实验采用乙腈－05%甲酸水溶液作为流动相。色谱柱的选择比较了常规结果表明，常规色谱柱分析时间长、流动相消耗大;快速分离色谱柱能够显着缩短分离时间，且具有更高的灵敏度及更好的分离度，在中药复杂组分的分离中更具优色谱柱的优化实验比较了正、负离子两种扫描模式下的色谱峰形，结果发现负离子模式下，色谱峰较多且质谱响应较好，故选择负离子模式扫描。另外还对其他质谱参数如毛细管电压、碎裂电压、锥孔电压、干燥气温度、干燥气流速、雾化气压进行了优化，得到最佳的质谱条件为:负离子模式扫描，雾化气N2压力345kPa，干燥气N2流速10Lmin，干燥气温精选公文范文管理资料[键入文字][键入文字][键入文字]毛细管电压4000V，碎裂电压100V，锥孔电压65癍痧凉茶化学成分鉴定在负离子模式下，大部分化合物检测得到［M－的准分子离子峰。通过分析HPLCMS色谱图中每个化合物的TOFMS高分辨质谱的精确分子量信息，可以推测出化合物可能的分子式;根据级质谱碎片的信息则能够推测出化合物可能的结构信息。“黄振龙”和“平安堂”两种癍痧凉茶总共含有40个主要化学成分分别为“黄振龙”及“平安堂”癍痧凉茶的基峰离子流图，图中种癍痧凉茶的化学成分鉴定情况。通过与对照品比较保留时间、准分子离子峰和多级质谱碎片信息，13个化合物得到了确证，其号峰为苹果酸，4号峰为柠檬酸，5号峰为隐绿原酸，11号峰为木犀草苷，15精选公文范文管理资料[键入文字][键入文字][键入文字]绿原酸A，17峰为黄芩苷，化合物13、14、18、19推测可能为鞣花酸、野黄芩苷、薄叶黄芩甙、牡荆素异牡荆素。化合物9、10、1240号峰具有较大的峰面积，显示失去葡萄糖162］－的信号，从质谱信息推断可能为三萜皂苷类化合物，由于缺乏对照品不能得到确证。表给出了“黄振龙”和“平安堂”癍痧凉茶中的40个共有峰的保留时间、分子式以及ESIMSn产生的主要碎片离子。从化学成分分析的结果来看，“黄振龙”和“平安堂”癍痧凉茶的主要化学成分为有机酸、黄酮类和三萜皂苷类成分，两种凉茶的有机酸和黄酮类成分很相似，但三萜皂苷类成分的差异较大，提示两种凉茶的配方组成和生产工艺存在一定差异。21批次“黄振龙”癍痧凉茶样品溶液和20批次“平安堂”癍痧凉茶样品溶精选公文范文管理资料[键入文字][键入文字][键入文字]液，在优化实验条件下进行指纹图谱分析并记录质量色谱图。将每个样品的BPCBasepeakchromatogram质量色谱图导出为 csv文件，作为每个样品的 HPLC MS指纹图谱，用于统计学分析。 系统适应性试验取样品 HZL01 的供试品溶液，在优化条件下，连 ，考察各共有峰的相对保留时间及相对峰面积的一致性。结果显示各共有峰相对保 留时间的 ＲSD 值不大于 79%，相对峰面积的 ＲSD 值不大于 7%，表明仪器分析的精密度良好。 重复性试验取同一批号样品 份，分别配成供试品溶液进行测定，以绿原酸色谱峰为参照峰 察各共有峰的相对保留时间及相对峰面积的重复性。结果显示各共有峰相对保留时间 ＲSD不大于 精选公文范文管理资料[键入文字] [键入文字] [键入文字] SD 值不大于 2%，表明该方法的重现性良好。 稳定性试验取同一批号样品 HZL01的供试品溶液，分别在 ，考察各共有峰的相对保留时间及相对峰面积的稳定性。结果显示各共有峰 相对保留时间的 ＲSD 值不大于 96%，相对峰面积的 ＲSD 值不大于 7%，表明供试品溶液在24 主成分分析是利用降维的思想，在损失很少信息的前提下把多个指标转化为几 个综合指标的多元统计方法。本文以色谱峰 的峰面积为变量，以 41 批癍痧凉茶为观察 对象，采用 SIMCA DEMO统计 分析软件对 41 批次的癍痧凉茶样本进行 主成分分析。主成分个数提取原则为主成分 对应的特征值大于 个主成分。从方差贡献率来看，λ1= 19 3，贡献率为 68 精选公文范文管理资料 [键入文字] [键入文字] [键入文字] 8% ，贡献率最大、包含的信息最多; 51，贡献率为16 1% 个主成分的累计贡献率即达 84 9% 个主成分分析已经能反映癍痧凉茶的基本特征。分别以 第一和第二主成分建立坐标系，进行投影即 可得到所有样本的 PCA 得分图和载荷图， 得分图用来区分样本，载荷图则可以用来分 析变量对样本分类所起的作用。 2A为癍痧凉茶的二维 PCA 得分 图。图中每个点代表一个样本，其中 表黄振龙凉茶，P代表平安堂凉茶。从图 2A 可看到两种癍痧凉茶得到良好的区分。其中 黄振龙凉茶 H01 H21和平安堂凉茶 P20能够明显的分为两类，代表 这两种凉茶存在着差异。 2B为癍痧凉茶的二维 PCA 载荷图。图中每个点代表一个色谱峰。色谱 峰的系数绝对值在载荷图中得分越高，表明 该峰对样品分类所起的作用越大。3 分中，第一大主成分是特征值最大的，即“信息最多”的指标，第一主成分中系数的绝 对值越大，对样本分类所起的作用越大。从 精选公文范文管理资料 [键入文字] [键入文字] [键入文字] 2B能够看到 685、793、955、727、845、889 的峰系数的绝对值最大。结合图 2A 的二维主成分得分图分析，可以看出 685、793、955这三个峰与第一主成分 呈负相关，并且与 “平安堂”癍痧凉茶所在 区域相对应，表明这三个峰对 “平安堂”癍 痧凉茶的分类起着重要作用，mz 727、845、 889 三个峰与第一主成分呈正相关，并且与 “黄振龙”癍痧凉茶所在区域相对应，说明这 三个峰对 “黄振龙”癍痧凉茶的分类起着重 要作用。主成分分析的结果表明，黄振龙和 平安堂两个厂家的癍痧凉茶之间的化学成 分和内在质量具有显着差异，提示配方组成 及生产工艺可能不同，应该予以区分。 “黄振龙”和“平安堂”癍痧凉茶的 化学成分分析可以看出，两种癍痧凉茶既含 有相同的化学成分也含有不同的化学成分。 两种癍痧凉茶的液质联用指纹图谱及其主 成分分析结果表明 “黄振龙”和 “平安堂”两 精选公文范文管理资料 [键入文字] [键入文字] [键入文字] 个厂家的癍痧凉茶之间的化学成分和内在 质量具有显着性差异，提示配方组成及生产 工艺可能不同，应予以区分。本文所建立的 指纹图谱分析方法快速、高效、稳定，是癍 痧凉茶质量控制的有效手段。 InstrumAnal． 析测试学报，2012，31 12 1493－1498． CellaN，Bento Talanta，2010，8112 AnalChim Acta，2007， 583 103－110． InstrumAnal． 613－617． 精选公文范文管理资料 [键入文字] [键入文字] [键入文字] HeraldMed． 医药导报，2009，28 N，HanX，Qi Y，Xu AnalChim Acta，2009，633: 136 －148． ChinTradit Herb Drugs 张铁军， 中草药，2010， 41 H，ChengY，Luo ChinTradit Herb Drugs 中草药，2010，41 48－51． ChenY，Zhu P，LiuW，Li C，Gong AnalChim Acta，2008，623: 146 －156． ［10］Liu S，CaoM，Wang AnalChem． 分析化学，2006， 34 337．精选公文范文管理资料 [键入文字] [键入文字] [键入文字] ［11］Yao AnalChem． 分析化学，2009， 37 ［12］Wu X，GuX，Yan AnalChem． 析化学，2009，37 581－584． ［13］Zhoua Y，Xua G，Choi ChromatogrA，2009， 1216: 4847 ［14］Zhao 2005，821:67 －74． ［15］Chen AnalChim Acta，2008，613: 184 －195． ［16］Chen L，QiJ，Chang PharmBiomed Anal． ，2009，50: 127 －137． ［17］Wang H，Feng PharmBiomed Anal ，2009，49: 1157 精选公文范文管理资料[键入文字] [键入文字] [键入文字] 1165． 标签: 上一篇：AQ2 间断化学分析仪用于检测水样中氨氮的可